کیت تست سریع IgG/IgM لیشمانیا (طلای کلوئیدی)

لیشمانیوز احشایی یا کالاآزار یک عفونت منتشر است که توسط چندین زیرگونه از L. donovani ایجاد می شود.این بیماری توسط سازمان جهانی بهداشت (WHO) تخمین زده می شود که تقریباً 12 میلیون نفر در 88 کشور جهان را مبتلا کرده است.این بیماری از طریق نیش پشه خاکی فلبوتوموس به انسان منتقل می شود که از طریق تغذیه از حیوانات آلوده عفونت ایجاد می کند.اگرچه این بیماری در کشورهای فقیر یافت می شود، اما در جنوب اروپا به عفونت فرصت طلب اصلی در بیماران مبتلا به ایدز تبدیل شده است.شناسایی ارگانیسم L. donovani از خون، مغز استخوان، کبد، غدد لنفاوی یا طحال یک روش قطعی برای تشخیص فراهم می کند.تشخیص سرولوژیک آنتی L.donovani IgM یک نشانگر عالی برای لیشمانیوز حاد احشایی است.تست های مورد استفاده در کلینیک شامل ELISA، آنتی بادی فلورسنت یا آزمایش آگلوتیناسیون مستقیم 4-5 می باشد.اخیراً استفاده از پروتئین اختصاصی L. donovani در آزمون حساسیت و ویژگی را به طور چشمگیری بهبود بخشیده است.

تست سریع ترکیبی IgG/IgM لیشمانیا یک تست سرولوژیکی مبتنی بر پروتئین نوترکیب است که آنتی‌بادی‌های IgG و IgM را به L. Donovani به طور همزمان تشخیص می‌دهد.این تست در عرض 15 دقیقه بدون هیچ ابزاری نتیجه قابل اعتمادی را ارائه می دهد.

تست سریع IgG/IgM لیشمانیا یک روش ایمونواسی کروماتوگرافی جریان جانبی است.کاست آزمایش شامل: 1) یک پد مزدوج رنگ شرابی حاوی آنتی ژن نوترکیب L. donovani کونژوگه با طلای کلوئیدی (مجموعه‌های لیشمانیا) و کونژوگه‌های IgG-طلا خرگوش، 2) یک نوار غشایی نیتروسلولزی حاوی دو نوار آزمایشی (T1) و یک باند کنترل (باند C).نوار T1 از قبل با IgM ضد انسانی مونوکلونال برای تشخیص anti-L پوشیده شده است.باند donovani IgM، T2 با معرف‌هایی برای تشخیص آنتی L از قبل پوشش داده شده است.donovani IgG، و نوار C با IgG ضد خرگوش بز از قبل پوشش داده شده است.

هنگامی که حجم کافی از نمونه آزمایش در چاه نمونه کاست توزیع می شود، نمونه با عمل مویرگی در سراسر کاست مهاجرت می کند.L. donovani IgM در صورت وجود در نمونه به مزدوج های لیشمانیا متصل می شود.سپس ایمونوکمپلکس توسط آنتی بادی ضد IgM از قبل پوشش داده شده روی غشاء گرفته می شود و یک نوار T1 رنگ شرابی را تشکیل می دهد که نشان دهنده نتیجه تست IgM L. donovani مثبت است.اگر L. donovani IgG در نمونه وجود داشته باشد به مزدوج های لیشمانیا متصل می شود.سپس ایمونوکمپلکس توسط معرف های از پیش پوشش داده شده روی غشاء گرفته می شود و یک نوار T2 رنگ شرابی را تشکیل می دهد که نشان دهنده یک نتیجه تست L. donovani IgG مثبت است.

عدم وجود هر باند T (T1 و T2) نشان دهنده یک نتیجه منفی است.این آزمایش شامل یک کنترل داخلی (باند C) است که باید یک نوار رنگی شرابی از ترکیب ایمنی بز ضد خرگوش IgG/خرگوش IgG-طلا را بدون توجه به رشد رنگ در هر یک از باندهای T نشان دهد.در غیر این صورت، نتیجه آزمایش نامعتبر است و نمونه باید دوباره با دستگاه دیگری آزمایش شود.