خلاصه و توضیح آزمون
مالاریا یک بیماری تب دار، همولیتیک و منتقله از پشه است که بیش از 200 میلیون نفر را مبتلا می کند و سالانه بیش از یک میلیون نفر را می کشد.این بیماری توسط چهار گونه پلاسمودیوم ایجاد می شود: P. falciparum، P. vivax، P. ovale و P. malariae.این پلاسمودیاها همگی گلبول های قرمز انسان را آلوده کرده و از بین می برند و باعث ایجاد لرز، تب، کم خونی و اسپلنومگالی می شوند.P. falciparum باعث بیماری شدیدتری نسبت به سایر گونه های پلاسمودیایی می شود و بیشترین مرگ و میر مالاریا را به خود اختصاص می دهد و یکی از دو پاتوژن شایع مالاریا است.
به طور سنتی، مالاریا با نمایش ارگانیسم‌ها بر روی لام‌های ضخیم رنگ‌آمیزی گیمسا از خون محیطی تشخیص داده می‌شود و گونه‌های مختلف پلاسمودیوم با ظاهرشان در گلبول‌های قرمز آلوده متمایز می‌شوند.این تکنیک قادر به تشخیص دقیق و قابل اعتماد است، اما تنها زمانی که توسط میکروسکوپ‌های ماهر با استفاده از پروتکل‌های تعریف‌شده انجام شود، که موانع بزرگی را برای مناطق دورافتاده و فقیر جهان ایجاد می‌کند.
تست سریع Pf Ag برای حل این موانع توسعه یافته است.آنتی ژن اختصاصی Pf pHRP-II را در نمونه خون انسان تشخیص می دهد.این می تواند توسط پرسنل آموزش ندیده یا با حداقل مهارت و بدون تجهیزات آزمایشگاهی انجام شود.
اصل
آزمایش سریع Pf Ag یک روش ایمونواسی کروماتوگرافی جریان جانبی است.اجزای نوار تست شامل: 1) یک پد مزدوج رنگ شرابی حاوی آنتی بادی مونوکلونال ضد pHRP-II کونژوگه با طلای کلوئیدی (مزوجات pHRP II-طلا)، 2) یک نوار غشایی نیتروسلولزی حاوی یک نوار تست (Pf) و یک نوار کنترل (باند C).نوار Pf از قبل با آنتی بادی های ضد pHRP-II پلی کلونال و نوار C از قبل با IgG ضد موش بز پوشش داده شده است.
در طول آزمایش، حجم مناسبی از نمونه خون در چاه نمونه (S) کاست آزمایش توزیع می شود، یک بافر لیز به چاه بافر (B) اضافه می شود.بافر حاوی ماده شوینده ای است که گلبول های قرمز خون را لیز می کند و آنتی ژن pHRPII را آزاد می کند که با اثر مویرگی در سراسر نوار نگه داشته شده در کاست حرکت می کند.اگر pHRP-II در نمونه موجود باشد به ترکیبات pHRP II-طلا متصل می شود.سپس ایمونوکمپلکس توسط آنتی بادی های ضد pHRP II پلی کلونال از قبل پوشش داده شده روی غشاء گرفته می شود و یک نوار Pf رنگ شرابی را تشکیل می دهد که نشان دهنده نتیجه تست Pf مثبت است.
عدم وجود باند Pf نشان دهنده یک نتیجه منفی است.این آزمایش شامل یک کنترل داخلی (باند C) است که باید یک نوار رنگی شرابی از مجموعه ایمنی ضد موش بز IgG / IgG موش (مجموعه های pHRP II-طلا) را بدون توجه به رشد رنگ در هر یک از نوارهای Pf نشان دهد.در غیر این صورت، نتیجه آزمایش نامعتبر است و نمونه باید دوباره با دستگاه دیگری آزمایش شود.
