خلاصه و توضیح آزمون
مالاریا یک بیماری تب دار، همولیتیک و منتقله از پشه است که بیش از 200 میلیون نفر را مبتلا می کند و سالانه بیش از یک میلیون نفر را می کشد.این بیماری توسط چهار گونه پلاسمودیوم ایجاد می شود: P. falciparum، P. vivax، P. ovale و P. malariae.این پلاسمودیاها همگی گلبول های قرمز انسان را آلوده کرده و از بین می برند و باعث ایجاد لرز، تب، کم خونی و اسپلنومگالی می شوند.P. falciparum باعث بیماری شدیدتری نسبت به سایر گونه های پلاسمودیایی می شود و بیشترین مرگ و میر ناشی از مالاریا را تشکیل می دهد.P. falciparum و P. vivax شایع ترین پاتوژن ها هستند، با این حال، تنوع جغرافیایی قابل توجهی در توزیع گونه ها وجود دارد.
به طور سنتی، مالاریا با نمایش ارگانیسم‌ها بر روی لام‌های ضخیم رنگ‌آمیزی گیمسا از خون محیطی تشخیص داده می‌شود و گونه‌های مختلف پلاسمودیوم با ظاهرشان در گلبول‌های قرمز آلوده متمایز می‌شوند.این تکنیک قادر به تشخیص دقیق و قابل اعتماد است، اما تنها زمانی که توسط میکروسکوپ‌های ماهر با استفاده از پروتکل‌های تعریف‌شده انجام شود، که موانع بزرگی را برای مناطق دورافتاده و فقیر جهان ایجاد می‌کند.
مالاریا Pf/Pv Ag Rapid Test برای حل این موانع توسعه یافته است.از آنتی بادی های اختصاصی P. falciparum هیستیدین غنی از پروتئین-II (pHRP-II) و P. vivax لاکتات دهیدروژناز (Pv-LDH) برای تشخیص و تمایز همزمان عفونت با P. falciparum و P. vivax استفاده می کند.این آزمایش را می توان توسط پرسنل آموزش ندیده یا با حداقل مهارت و بدون تجهیزات آزمایشگاهی انجام داد
اصل
تست سریع مالاریا Pf/Pv Ag یک روش ایمونواسی کروماتوگرافی جریان جانبی است.اجزای تست نوار عبارتند از: 1) یک پد مزدوج رنگ شرابی حاوی آنتی بادی ضد Pv-LDH موش کونژوگه با طلای کلوئیدی (مجموعه های Pv-LDH-طلا) و آنتی بادی ضد pHRP-II موش کونژوگه با طلای کلوئیدی (pHRP-II-غشاء باند طلایی حاوی دو غشای مختلط نیتر سلولی طلایی) باندهای v و Pf) و یک باند کنترل (باند C).نوار Pv با آنتی بادی دیگر ضد Pv-LDH موش برای تشخیص عفونت Pv، باند Pf با آنتی بادی های پلی کلونال ضد pHRP-II برای تشخیص عفونت Pf و نوار C با IgG ضد موش بز پوشش داده شده است.
در طول آزمایش، حجم مناسبی از نمونه خون در چاه نمونه (S) کاست آزمایش توزیع می شود، یک بافر لیز به چاه بافر (B) اضافه می شود.بافر حاوی مواد شوینده‌ای است که گلبول‌های قرمز خون را لیز می‌کند و آنتی‌ژن‌های مختلفی را آزاد می‌کند که با اثر مویرگی در سراسر نوار نگه‌داشته شده در کاست مهاجرت می‌کنند.Pv-LDH اگر در نمونه وجود داشته باشد به مزدوجات Pv-LDH-طلا متصل می شود.سپس ایمونوکمپلکس توسط آنتی بادی ضد Pv-LDH از پیش پوشش داده شده روی غشاء گرفته می شود و یک نوار Pv رنگ شرابی را تشکیل می دهد که نشان دهنده نتیجه تست Pv مثبت است.روش دیگر، اگر pHRP-II در نمونه وجود داشته باشد، به ترکیبات pHRP-II-طلا متصل می شود.سپس ایمونوکمپلکس توسط آنتی بادی های ضد pHRP-II از قبل پوشش داده شده روی غشاء گرفته می شود و یک نوار Pf رنگ شرابی را تشکیل می دهد که نشان دهنده نتیجه تست Pf مثبت است.فقدان هر باند تست حاکی از نتیجه منفی است.این آزمایش حاوی یک کنترل داخلی (باند C) است که باید یک نوار رنگی شرابی از ترکیبات ایمنی IgG ضد موش بز / IgG موش (ضد Pv-LDH و ضد pHRPII) - طلایی را بدون توجه به رشد رنگ روی هر یک از نوارهای آزمایشی نشان دهد.در غیر این صورت، نتیجه آزمایش نامعتبر است و نمونه باید دوباره با دستگاه دیگری آزمایش شود.
