خلاصه و توضیح آزمون
اسهال یکی از علل اصلی مرگ و میر کودکان در سراسر جهان است که سالانه 2.5 میلیون مرگ را به دنبال دارد.عفونت روتاویروس عامل اصلی اسهال شدید در نوزادان و کودکان زیر پنج سال است که 40 تا 60 درصد از گاستروانتریت حاد را تشکیل می دهد و تخمین زده می شود که سالانه 500000 مرگ و میر در دوران کودکی را به همراه داشته باشد.تا سن پنج سالگی، تقریباً هر کودک در جهان حداقل یک بار به روتاویروس مبتلا شده است.با عفونت های بعدی، یک پاسخ آنتی بادی گسترده و هتروتیپی ایجاد می شود.بنابراین، بزرگسالان به ندرت تحت تاثیر قرار می گیرند.
تا به امروز هفت گروه از روتا ویروس ها (گروه های AG) جدا شده اند
مشخص شده است.روتاویروس گروه A، رایج ترین روتاویروس، عامل بیش از 90 درصد عفونت های روتا ویروس در انسان است.روتاویروس عمدتاً از طریق مدفوع و مستقیماً از فردی به فرد دیگر منتقل می شود.تیتر ویروس در مدفوع مدت کوتاهی پس از شروع بیماری به حداکثر می رسد، سپس کاهش می یابد.دوره نهفتگی عفونت روتاویروس معمولاً یک تا سه روز است و پس از آن گاستروانتریت به طور متوسط بین سه تا هفت روز طول می کشد.علائم این بیماری از اسهال خفیف و آبکی تا اسهال شدید همراه با تب و استفراغ متغیر است.
تشخیص عفونت با روتاویروس پس از تشخیص گاستروانتریت به عنوان علت اسهال شدید در کودکان قابل انجام است.اخیراً، تشخیص اختصاصی عفونت با روتاویروس از طریق تشخیص آنتی ژن ویروس در مدفوع با روشهای ایمونواسی مانند روش آگلوتیناسیون لاتکس، EIA و ایمونواسی کروماتوگرافی جریان جانبی در دسترس قرار گرفته است.
تست سریع روتاویروس Ag یک روش ایمونواسی کروماتوگرافی جریان جانبی است که از یک جفت آنتی بادی خاص برای تشخیص کیفی آنتی ژن روتاویروس در نمونه مدفوع استفاده می کند.این آزمایش را می توان بدون تجهیزات آزمایشگاهی دست و پا گیر انجام داد و نتایج در عرض 15 دقیقه در دسترس است.
اصل
تست سریع روتاویروس Ag یک روش ایمونواسی کروماتوگرافی جریان جانبی است.نوار تست شامل: 1) یک پد مزدوج رنگ شرابی حاوی آنتی بادی ضد روتا ویروس مونوکلونال کونژوگه با طلای کلوئیدی (مجموعه های ضد روتاویروس) و یک آنتی بادی کنترل کونژوگه با طلای کلوئیدی، 2) یک نوار غشایی نیتروسلولزی حاوی یک خط آزمایش (T) خط) و یک خط کنترل (خط C).خط T از قبل با آنتی بادی مونوکلونال ضد روتاویروس دیگر پوشش داده شده است و خط C با یک آنتی بادی خط کنترل از قبل پوشش داده شده است.
هنگامی که حجم کافی از نمونه استخراج شده در چاه نمونه کاست آزمایش توزیع می شود، نمونه با عمل مویرگی در سراسر کاست مهاجرت می کند.روتاویروس Ag در صورت وجود در نمونه به ترکیبات ضد روتاویروس متصل می شود.سپس ایمونوکمپلکس توسط آنتی بادی روتاویروس از قبل پوشش داده شده روی غشاء گرفته می شود و یک خط T رنگ شرابی را تشکیل می دهد که نشان دهنده نتیجه تست روتاویروس مثبت است. عدم وجود خط T نشان می دهد که غلظت روتاویروس Ag در نمونه کمتر از سطح قابل تشخیص است. نشان دهنده یک نتیجه منفی روتاویروس است.این آزمایش شامل یک کنترل داخلی (خط C) است که باید یک خط رنگی شرابی از کمپلکس ایمنی آنتیبادیهای کنترل را بدون توجه به رشد رنگ در خط T نشان دهد.در غیر این صورت، نتیجه آزمایش نامعتبر است و نمونه باید دوباره با دستگاه دیگری آزمایش شود.